我正在努力与Bioconductor的EBImage合作开发一条管道来分析96孔板中记录的荧光显微镜图像,每张图片约有600个脂肪细胞。该实验比较WT和实验条件对荧光2-NBDG葡萄糖摄取的影响。 我每孔有两个图像:GFP通道(记录荧光)和Hoechst染色(染色所有细胞核进行细胞计数)。 是否有人知道或有任何人以前使用EBImage进行此类分析?我想在每个图像中定义细胞及其轮廓,想要测量所有细胞的荧光强度,并通过每个图像的细胞数进行标准化。 我目前使用ImageJ - 但是在手动调整阈值等方面存在很多的随意性,因此对于标准图像分析具有可检查的R脚本是好的和科学合适的。 在R中完成此任务的任何帮助(也许EBImage不是最好的包)?
非常感谢! 最好, 克里斯
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如果您打算坚持使用R,那么 EBImage 可能是您最好的选择。请查看package vignette和BioC2015 slides,了解该软件包提供的功能的一般概述。对于细胞表型的更具体应用,参见例如HD2013SGI vignette的图像分割和特征提取部分。